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基于抗体的细胞化学显示

免疫组织(细胞)染色技术

免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是用经标记的特异性抗体在组织细胞原位通过特异性抗原抗体反应和化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项技术。它将抗原抗体免疫反应的特异性、组织化学的可见性结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像与放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种细胞组织成分,如蛋白质、多肽、核酸、部分类酯、多糖、激素、病原体(寄生虫、细菌病毒)、受体、神经介质、肿瘤的标记物(抗原或相关抗原)等。是免疫学、病理生理学和蛋白质研究的重要技术手段。


免疫沉淀与免疫共沉淀

免疫沉淀(immunoprecipitation)是利用抗体可与抗原特异性结合的特性,将抗原(常为靶蛋白)从混合体系沉淀下来,初步分离靶蛋白的一种方法。
免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话,那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时,另一个蛋白也会被同时沉淀下来。与酵母双杂交技术不同,免疫共沉淀技术所利用的是抗原和抗体间的免疫反应,是一种基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用的方法。


免疫印迹

免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是一种借助特异性抗体鉴定抗原的有效方法。该方法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术,既具有凝胶电泳的高分辨率又具备固相免疫测定的高特异性和高灵敏性,可检测1-5ng的中等大小蛋白。其优点是方法简便、标本可长期保存、结果便于比较,故被广泛应用于分子生物学等领域,成为一种常用的一种研究方法。


蛋白芯片与抗体芯片

蛋白芯片
由于基因转录水平的研究只能在一定程度上反映基因表达产物的变化,而真正发挥功能的蛋白要经过转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等许多步骤和调控才能形成,因而对蛋白质的直接研究才能真实的解释各种生命现象。但是目前研究蛋白质的手段和方法还没有很大的发展,所以寻找有效、快捷的蛋白分析技术成为了至关重要的一个环节。蛋白芯片技术的出现给蛋白组学研究带来新思路。蛋白质芯片也叫蛋白质微阵列 ( protein microarray),是将大量蛋白质有规律地固定到某种介质载体上,利用蛋白质与蛋白质、酶与底物、受体与配体、抗原与抗体、蛋白质与其他小分子之间的相互作用,借以检测和分析蛋白质的一种技术。

抗体芯片
利用蛋白质芯片分析蛋白质功能已成为一种趋势。通常,一个蛋白质芯片上可以容纳一种蛋白质的所有变异体,一个蛋白质家族的所有成员,一条信号通路中的所有蛋白质,甚至是来自一种组织、器官或有机体的所有蛋白。蛋白质芯片利用位于芯片表面上的探针来捕获各种待检测的蛋白质,最常用的探针是抗体,这是由于抗原-抗体的反应有着非常强的特异性。这种以各种抗体为探针的蛋白质芯片常被称作抗体芯片。